近年来，非破坏性的原位采样技术逐渐受到重视。原位采样技术以目标物在不同化学势能驱动下从样本介质到收集介质的自由扩散为基本原理，可以在不影响待测样品浓度及周围环境的情况下实时收集目标物，通过分析采样器中目标物含量可以真实反映出待测环境体系中的在采样器放置时间内的平均浓度。在湖泊生态系统中，虽然已经认识到凯发k8国际官网-水界面的物理、化学和生物学特征决定了污染物的环境行为，但是，对环境微界面过程的深入研究关键取决于微界面过程的测量技术，如果没有相应的微界面测量技术手段，则相关研究始终不能进一步开展。传统的采样方法由于空间分辨率低(一般为厘米级)和容易破坏凯发k8国际官网原有结构等，分析结果可能有较大的偏差。原位高分辨率(毫米级)的被动采样技术，如微孔穿刺电极、透析装置(Peeper)技术、薄膜扩散平衡(diffusive equilibrium in thin films，DET)技术、薄膜扩散梯度(diffusive gradients in thin films，DGT)技术，很好地解决了这一问题。


微电极测定系统


微电极是一种在高灵敏度、不破坏检测对象的结构和生理活性的基础上，利用电信号传输所建立的可观察目标离子微小浓度变化的测量技术。原位在线测量的特点使其可应用于水-凯发k8国际官网界面的识别，大多用于分析水-凯发k8国际官网界面附近的介质的理化指标的变化趋势。研究显示，水-凯发k8国际官网界面附近包含大量有机物质和无机物质，且这些物质可在微生物以及底栖生物作用下快速循环、再生，如底栖生物扰动强度和类型决定了溶解氧的浓度和渗透深度，从而控制了环境中凯发k8国际官网氧化还原界面的深度。不仅有机质的降解以及好氧生物活动将消耗大量的氧，而且一些还原性物质的氧化也要消耗氧，这些反应在消耗氧的同时释放出大量的酸，使得凯发k8国际官网表层存在着极陡的浓度梯度(如pH值和一些营养元素等)。常规的采样和分析方式由于采样时温度、压力、水动力、底栖扰动条件的改变以及采样过程中人为的污染等因素，无法获得可靠的高分辨率数据来满足精确认识表层凯发k8国际官网内发生的生物、化学过程需求。随着研究的推进，早期用于生理学领域的选择性膜微电极开始应用于在凯发k8国际官网特性研究，大大改变了人们对发生在凯发k8国际官网表层的生物化学过程的认识。


1980年，Revsbech首先将微电极引入海洋凯发k8国际官网方面的研究。随后，Hulth等采用氧微电极和pH微电极测定了海洋中水-凯发k8国际官网微界面DO和pH值的分布规律。国外学者将微电极成功应用于海洋领域后，我国不少学者也意识到微电极在我国的湖泊研究中将会有很大的发展前景，逐渐开始将微电极引入水环境领域研究。王建军等首次将微电极引入湖泊生态系统指标测定，研究采样溶解氧微电极，测量了太湖及南四湖多点位凯发k8国际官网-水界面溶解氧的浓度变化，发现空间位置、生物扰动和凯发k8国际官网有机质含量极大地影响着界面附近的氧气交换速率。随后，徐洋等利用微电极测量系统研究了贵州红枫湖水-凯发k8国际官网界面附近溶解氧和H2S的凯发k8国际官网剖面分布特征，进一步证明微电极操作系统在湖泊凯发k8国际官网相关数据测定的可靠性与可行性。


Peeper技术


除了利用电信号建立的污染物原位测定技术，渗析法也被普遍用于污染信息的原位获得。这类技术的原理是应用一张渗析膜将间隙水采集室与间隙水分隔开。间隙水中的溶解性物质不断穿过渗析膜扩散至采集液中，直至采集室内溶剂的浓度与间隙水中待测的浓度相等，最后回收每个采样小室中的溶剂并测定其化学浓度，即可得到间隙水中待测溶剂浓度。Peeper装置由丙烯酸塑料和垂直的渗析膜组成。作为凯发k8国际官网孔隙水的原位测定手段，Peeper可测量分子量小于透析膜截留分子量的所有可溶性的金属形态。透析装置的主体由一系列小室组成，小室两侧覆盖一层透析膜，室内预先封装采样介质，利用透析膜过滤的特性，使凯发k8国际官网孔隙水中一些可溶离子和分子通过透析膜与透析装置中的采样介质并进行物质交换，放置一段时间后达到平衡。其优点在于可以分离出可溶性的物质形态，采样过程不会对环境造成污染，可以原位测量而不会改变样品的物理化学形态。为了满足不同的使用目的，最初的Peeper装置不断得到改进。2002年，Lewandowski等发明了二维的Peeper装置，用于测定间隙水中二维的溶解态信息。Xu等改进了原有的Peeper技术，将分辨率提高到了2 mm，并且缩短了平衡时间至48 h，克服了之前的Peeper低空间分辨率(～1 cm)和平衡时间长(几周)的顽疾。由于Pepper在收集间隙水中溶解态As的同时也会收集其他污染物质信息，加之环境中有效态As的浓度相对较低，故其获得的As污染信息往往易受其他元素干扰。


DET技术


DET技术是利用离子在介质与水体之间的被动扩散来实现原位采样的目的。与透析装置法相比，DET技术采用水凝胶而不是去离子水或电解质溶液为采样技术，具有更高的空间分辨率，更短的平衡时间，并且结构更加简单易用。DET技术以水凝胶(扩散相)与外部水体中被监测物质的浓度梯度为动力，随着扩散过程的进行，浓度梯度不断减�。敝廖悖锏嚼┥⑵胶�，平衡后完成采样过程。然而DET技术和Peeper技术都不能有选择性地吸收待测元素，即两者不具备形态选择性，无法区分重金属的无机形态和有机小分子，只要被监测物质的可溶性形态能够扩散到水凝胶中，就能够被测量，故其应用得到限制。与Pepper技术的缺点相似，DET技术测定的间隙水中溶解态As浓度由于受到自身浓度较低的影响，所得结果极易与实际浓度产生误差。


DGT技术


与其他传统的形态分析技术相比，由英国科学家Davison等1994年发明的DGT技术能更好地反映生物体所吸收的重金属。DGT技术引入了一个动态概念，可以通过模拟植物或者其他生物对重金属的吸收过程来进行重金属生物有效性研究。该技术可以更加真实有效地模拟介质动态反应过程，并运用模型可以估算介质动态过程的动力学参数，从而能够更好地评估介质运输动态过程的重要性，因此所获结果不仅仅包括凯发k8国际官网间隙水中溶解态物质的浓度，还包括凯发k8国际官网固相向间隙水释放补给的污染物质浓度。DGT装置由过滤膜(filter membrane)、扩散膜(diffusion gel)和吸附膜(resin gel)以及固定这3层膜的塑料外套组成。其中过滤膜主要用来避免待测环境中的颗粒物进入DGT装置，扩散膜能够让溶液态的离子自由扩散，吸附膜可以根据实验目的选择不同的吸附材质。DGT技术的关键点是能够定量测定环境中元素浓度。


DGT技术以菲克(Fick)扩散第一定律为其理论基�。霉潭び胍合嘀湫纬傻呐ǘ忍荻�，对通过固定时间内穿过一定厚度的扩散膜的元素进行计算而获得准确的元素的有效态浓度值。相对于Pepper和DET技术，DGT技术对污染物的测定具有形态的选择性并且对获得的有效态浓度具有预浓缩作用。随着研究的深入，DGT技术针对有效态As的测定方法在不断改进。以往研究报道显示，Ferrihydrite、二氧化钛(TiO2)、氧化锆(ZrO)为吸附剂所制作的DGT装置可有效用于环境中As污染状况的评价，且以Ferrihydrite为吸附剂制作的DGT装置已经成熟商业化，具有广泛的应用基础。2002年，Zhang等利用Slurry Ferrihydrite DGT测定凯发k8国际官网中有效态As的浓度，并首次将有效态As在水-凯发k8国际官网界面的竖直分布信息精确到毫米，且直接证明凯发k8国际官网中有效态As与Fe的浓度具有较好的相关性。随后，Panther等采用Slurry Ferrihydrite制作固定膜，对水环境中有效态As浓度进行测定，并侧重分析了pH值、阴阳离子、有机酸等环境因素对该技术评价As的生物毒性的影响。结果显示，该种DGT装置可不受外部测定条件干扰，较好地应用于水环境有效态As的浓度测定。pH值在3～7时，该DGT装置所吸收As的量与计算理论值相符；阴阳离子浓度在自然水体4倍浓度范围之内时，该DGT装置仍表现出良好的有效态As浓度测定结果。由于Ferrihydrite的极强不稳定性，该种DGT装置的吸附容量和抗老化性能一直是限制该技术广泛应用的主要原因。基于此种DGT装置的不足，2010年，Luo等针对Slurry Ferrihydrite进行改善获得Precipitated Ferrihydrite材料，并将其应用于新型DGT固定膜的制作。Precipitated Ferrihydrite DGT实验结果显示，相对于Slurry Ferrihydrite DGT，新型的Precipitated Ferrihydrite DGT提高了As离子的吸附容量，对As的容量由9.6μg/cm2增加到27.7μg/cm2。抗环境干扰性能也表现较好：pH值在3.12～6.98范围内，对As的累积量与理论值相符，但pH值大于7.82时，该种DGT对As(Ⅴ)累积表现出抑制作用；在1～100 mM的离子强度条件下(以NaNO3计)，该种DGT装置对As的吸收和积累仍表现正常。但新型的Precipitated Ferrihydrite DGT装置由于Ferrihydrite颗粒的不稳定性，新型沉淀型铁膜的抗老化性能极差，其有效使用期仅为40 d左右。


基于以上研究，Panther等以TiO2为吸附剂发明了一种新型Metsorb DGT装置。Metsorb DGT装置对溶液中的无论是三价还是五价As都遵循DGT的理论进行动力学的吸收累积。该种DGT装置具有较为理想的抗环境干扰性，pH值和离子强度的变化对其测定有效态As的结果无明显影响。Bennett等将Metsorb DGT装置和Slurry Ferrihydrite DGT装置应用于对比研究水环境中有效态As浓度，结果显示，Metsorb DGT装置对As离子的选择吸附性明显强于Slurry Ferrihydrite DGT装置，且Slurry Ferrihydrite DGT装置测定所得的As浓度明显低于环境中的实际值。Metsorb DGT装置对有效态As的测定性能明显优于Slurry Ferrihydrite DGT装置，但由于Metsorb DGT装置对As(Ⅲ)的吸附容量明显低于Slurry Ferrihydrite DGT装置(前者仅为后者吸附容量的40%)，这一特性局限了Metsorb DGT装置在As(Ⅲ)占主导以及污染条件复杂的环境中的应用，加之Metsorb膜制备条件苛刻、Metsorb颗粒分布的不均匀性以及吸附介质易团聚等，Metsorb DGT装置的应用以及近一步研究受到了限制。


基于现有DGT技术制作成本高、固定膜的性能不稳定、吸附容量低、选择性差等不足,Sun等在利用Zr-oxide DGT装置测定有效态P的基础上，将其应用于湖泊有效态As的测定研究。Zr-oxide DGT装置对有效态As的测定表现出令人满意的结果，该种DGT装置对As(Ⅲ)和As(Ⅴ)的吸附容量分别达到51.3μg/cm2和138.9μg/cm2。且该种DGT装置具有理想的抗环境干扰性能，pH值和离子强度对有效态As的测定无影响。其在抗老化效应方面也表现良好，固定膜的正常使用时限可达2 a以上，远远优于Precipitated Ferrihydrite膜的38 d。但以上罗列的DGT装置所获得的浓度是对As(Ⅲ)和As(Ⅴ)的共同测定结果，无法单一测定生物毒性最强的As(Ⅲ)或生物有效性相对较弱的As(Ⅴ)浓度。而以硅胶为吸附剂所制成的DGT装置可专性吸附As(Ⅲ)离子，但由于该种DGT装置固定膜的吸附性能易受环境因子和老化效应干扰，大规模野外应用成效仍需验证。