ϸ°ûÅàÑø»ù£¨cell culture medium£©ÊÇÈ˹¤Ä£Ä⶯Îïϸ°ûµÄÌåÄÚÉú³¤»·¾³£¬Î¬³ÖÌåÍâϸ°û´æ»îºÍÔöÖ³µÄÓªÑøÎïÖÊ»ù´¡£¬ÆäÖ÷Òª¹¦ÄÜÊÇΪϸ°ûÌṩÊÊÒ˵ÄpHºÍÉø͸ѹ£¬ÒÔ¼°Ï¸°û±¾Éí²»Äܺϳɵĸ÷ÖÖÓªÑøÎïÖÊ¡£±¾ÎĽ«¶Ôϸ°ûÅàÑø»ùµÄÖÖÀà¡¢³É·Ö¼°Àí»¯ÐÔÖÊ£¬ÒÔ¼°Ïà¹ØÎÊÌâµÈ·½Ãæ½øÐнéÉÜ¡£


1¡¢Ï¸°ûÅàÑø»ùµÄÖÖÀà

°´ÕÕϸ°ûÅàÑø»ùµÄ·¢Õ¹ÀúÊ·£¬Ï¸°ûÅàÑø»ù´óÖ¿ɷÖΪƽºâÑÎÈÜÒº¡¢ÌìȻϸ°ûÅàÑø»ù¡¢ºÏ³Éϸ°ûÅàÑø»ù¡¢ÎÞѪÇåϸ°ûÅàÑø»ù¡¢ÏÞ¶¨»¯Ñ§³É·Öϸ°ûÅàÑø»ùµÈ¼¸´óÖÖÀà¡£


1.1¡¢Æ½ºâÑÎÈÜÒº£¨balanced salt solution£¬BSS£©

BSSÖ÷ÒªÊÇÓÉÎÞ»úÑΡ¢ÆÏÌÑÌÇ×é³É£¬ËüµÄ×÷ÓÃÊÇά³Öϸ°ûÉø͸ѹƽºâ£¬±£³ÖpHÎȶ¨¼°Ìṩ¼òµ¥µÄÓªÑø¡£ÆäÖ÷ÒªÓÃÓÚϸ°ûµÄƯϴ¡¢ÅäÖÆÆäËûÊÔ¼ÁµÈ¡£¼¸ÖÖ³£ÓõÄBSSÅä·½ÈçÏ£¨±í1-1£©¡£

D-Hank'sÓëHank'sµÄÒ»¸öÖ÷ÒªÇø±ðÊÇÇ°Õß²»º¬ÓÐCa2+ºÍMg2+£¬Òò´ËD-Hank's³£ÓÃÓÚÅäÖÆÒÈøÈÜÒº¡£ÒòΪCa2+¡¢Mg2+ÊÇϸ°ûĤµÄÖØÒª×é³É³É·Ý£¬²ÎÓëϸ°ûÕ³¸½µÈ¹¦ÄÜ£¬Ê¹Óò»º¬Ca2+¡¢Mg2+µÄBSS¿É±ÜÃâϸ°û½áÍÅ¡£´ËÍ⣬HanksÒººÍEarleÒºÊdz£ÓõÄBSS»ù´¡ÈÜÒº£¬Ç°Õß»º³åÄÜÁ¦½ÏÈõ£¬ÊʺÏÓÚÃܱÕÅàÑø£»ºóÕß»º³åÄÜÁ¦½ÏÇ¿£¬ÊʺÏÓÚ5%CO2µÄÅàÑøÌõ¼þ¡£

±í1-1¼¸ÖÖ³£ÓõÄBSSÅä·½£¨g/L£©

1.2¡¢ÌìȻϸ°ûÅàÑø»ù

ÌìÈ»ÅàÑø»ùÖ¸À´×Ô¶¯ÎïÌåÒº»òÀûÓÃ×éÖ¯·ÖÀëÌáÈ¡µÄÒ»ÀàÅàÑø»ù£¬ÈçѪ½¬¡¢ÑªÇå¡¢ÁÜ°ÍÒº¡¢¼¦Åß½þ³öÒºµÈ¡£ÆäÓŵãÊÇÓªÑø³É·Ö·á¸»£¬ÅàÑøЧ¹ûÁ¼ºÃ£¬µ«È±µãÊdzɷָ´ÔÓ£¬À´Ô´ÊÜÏÞÇÒÖÆ×÷¹ý³Ì¸´ÔÓ¡¢Åú¼ä²îÒì´ó¡£Ä¿Ç°¹ã·ºÊ¹ÓõÄÌìÈ»ÅàÑø»ùÊÇѪÇ壬ÁíÍâ¸÷ÖÖ×éÖ¯ÌáÈ¡Òº¡¢´Ù½øϸ°ûÌù±ÚµÄ½ºÔ­ÀàÎïÖÊÔÚÅàÑøijЩÌØÊâϸ°ûÒ²ÊÇ*¡£

Ë®½âÈéµ°°×ÊÇÈé°×µ°°×¾­µ°°×øºÍëÄøˮ½âµÄ²úÎº¬·á¸»µÄ¶àëÄ¡¢°±»ùËáºÍ̼ˮ»¯ºÏÎï¡£Ò»°ãÅäÖƳÉ0.5%ÈÜÒº£¨²ÉÓÃƽºâÑÎÈÜÒºÈܽ⣩ÓëºÏ³ÉÅàÑø»ù£¨ÈçMEMϸ°ûÅàÑø»ù£©ÒÔ1:1µÄ±ÈÀý»ìºÏʹÓá£

Ä¿Ç°ÓÃÓÚϸ°ûÅàÑøµÄѪÇåÖ÷ÒªÊÇţѪÇ壬ÅàÑøijЩÌØÊâϸ°ûÒ²ÓÃÈËѪÇå¡¢ÂíѪÇåµÈ¡£Å£ÑªÇå¶Ô¾ø´ó¶àÊý²¸È鶯Îïϸ°û¶¼ÊÇÊʺϵÄ£¬µ«²¢²»ÅųýÔÚÅàÑøijÖÖϸ°ûʱʹÓÃÆäËû¶¯ÎïѪÇå¸üºÏÊÊ¡£ÑªÇåÖк¬Óи÷ÖÖѪ½¬µ°°×¡¢¶àëÄ¡¢Ö¬·¾¡¢Ì¼Ë®»¯ºÏÎï¡¢Éú³¤Òò×Ó¡¢¼¤ËØ¡¢ÎÞ»úÎïµÈ£¬ÕâЩÎïÖʶԴٽøϸ°ûÉú³¤»òÒÖÖÆÉú³¤»îÐÔÊÇ´ïµ½ÉúÀíƽºâµÄ¡£´ËÍ⣬ѪÇ庬һЩ¶Ôϸ°û²úÉú¶¾ÐÔµÄÎïÖÊ£¬Èç¶à°·Ñõ»¯Ã¸£¬ÄÜÓëÀ´×Ը߶ȷ±Ö³Ï¸°ûµÄ¶à°··´Ó¦£¨È羫°·¡¢ÑǾ«°·£©ÐγÉÓÐϸ°û¶¾ÐÔ×÷Óõľ۾«°·¡£²¹Ìå¡¢¿¹Ì塢ϸ¾ú¶¾Ëصȶ¼»áÓ°Ïìϸ°ûÉú³¤£¬ÉõÖÁÔì³Éϸ°ûËÀÍö¡£Ä¿Ç°£¬ÑªÇå¶à×÷ΪһÖÖÌí¼Ó³É·ÖÓëºÏ³ÉÅàÑø»ù»ìºÏʹÓã¬Ê¹ÓÃŨ¶ÈÒ»°ãΪ5~20%£¬-³£ÓÃÊÇ10%¡£

ÓÉÓÚË®½âÈéµ°°×ºÍѪÇå³É·Ý¸´ÔÓ£¬Åú¼ä²îÒì´ó¼°´æÔÚ²¡¶¾µÈÍâÔ´ÎÛȾ·çÏÕ£¬¶ÔÏÂÓÎÉúÎïÖÆÆ·µÄ·ÖÀë´¿»¯ºÍ°²È«ÐÔ¶¼´æÔڽϴóµÄÓ°Ï죬ÔÚÉúÎïÖÆÒ©ÐÐÒµµÄʹÓÃÒ²Ô½À´Ô½ÉÙ¡£Òò´Ë£¬»ùÓÚ¶ÔѪ½¬³É·ÝµÄ·ÖÎö£¬ºÏ³Éϸ°ûÅàÑø»ùÓ¦Ô˶øÉú¡£


1.3¡¢ºÏ³Éϸ°ûÅàÑø»ù

ºÏ³ÉÅàÑø»ùÊǸù¾ÝÌìÈ»ÅàÑø»ùµÄ³É·Ö£¬Óû¯Ñ§ÎïÖÊÄ£ÄâºÏ³É¡¢È˹¤Éè¼Æ¡¢ÅäÖƵÄÅàÑø»ù¡£Ô翪·¢µÄ»ù´¡ÅàÑø»ù£¨minimal essential medium,MEM£©£¬Æä±¾ÖÊΪº¬ÓÐÑΡ¢°±»ùËᡢάÉúËغÍÆäËû±ØÐèÓªÑøÎïµÄpH»º³åµÄµÈÉø»ìºÏÎï¡£ÔÚ´Ë»ù´¡ÉÏ£¬DMEM¡¢IMDM¡¢HAM F12¡¢PRMI1640µÈ¸÷ÖֺϳÉϸ°ûÅàÑø»ù±»²»¶Ï¿ª·¢³öÀ´¡£³£ÓúϳÉÅàÑø»ùµÄÅä·½´Ë´¦²»Ïêϸ½éÉÜ£¬ÆäÌØÐÔ¼°Ó¦Óõķ¶Î§¼û±í1-2¡£

±í1-2³£ÓúϳÉÅàÑø»ùµÄÌØÐÔ¼°Ó¦Óõķ¶Î§

ÓëÌìÈ»ÅàÑø»ùÏà±È£¬ÓÐЩÌìÈ»µÄδ֪³É·ÖÉÐÎÞ·¨ÓÃÒÑÖªµÄ»¯Ñ§³É·ÖËùÌæ´ú£¬Òò´Ë£¬Ï¸°ûÅàÑøÖÐʹÓúϳÉÅàÑø»ùʱ±ØÐë¼ÓÈëÒ»¶¨Á¿µÄÌìÈ»ÅàÑø»ù³É·Ö£¬ÒÔ¿Ë·þºÏ³ÉÅàÑø»ùµÄ²»×ã¡£-ÆÕ±éµÄ×ö·¨ÊÇÌí¼Ó5~10%µÄѪÇ壬ÕâÑù²ÅÄÜά³Öϸ°û»îÁ¦£¬´Ù½øϸ°ûÔöÖ³¡£Õë¶Ô²»Í¬µÄ¶¯Îïϸ°û£¬ÏÖÒÑ¿ª·¢Á˶àÖÖÉÌÒµ»¯¡¢¸öÐÔ»¯µÄµÍѪÇåϸ°ûÅàÑø»ùÅä·½£¬ÓªÑø³É·Ý¸ü¼Ó·á¸»£¬ÑªÇåʹÓÃÁ¿¿É½µµÍÖÁ1¡«3%£¬Óɴ˿ɼõÉÙÁËѪÇåµÈ¶¯ÎïÀ´Ô´³É·Ý¶ÔÉúÎïÖÆÆ·°²È«ÐÔµÄÓ°Ïì¡£


1.4¡¢ÎÞѪÇåϸ°ûÅàÑø»ù£¨serum free medium£¬SFM£©

¾­ÀúÁËÌìÈ»ÅàÑø»ù¡¢ºÏ³ÉÅàÑø»ùºó£¬ÎÞѪÇåÅàÑø»ùºÍÎÞѪÇåÅàÑø³ÉΪµ±½ñϸ°ûÅàÑøÁìÓòµÄÒ»´óÇ÷ÊÆ¡£²ÉÓÃÎÞѪÇåÅàÑø¿É½µµÍÉú²ú³É±¾£¬¼ò»¯·ÖÀë´¿»¯²½Ö裬±ÜÃⲡ¶¾ÎÛȾÔì³ÉµÄΣº¦¡£ÎÞѪÇåÅàÑø»ù£¬Ò»°ãÊÇÔںϳÉÅàÑø»ùµÄ»ù´¡ÉÏ£¬¼ÓÈë³É·ÝÍêÈ«Ã÷È·µÄ»ò²¿·ÖÃ÷È·µÄѪÇåÌæ´ú³É·Ý£¬´ïµ½¼ÈÄÜÂú×㶯Îïϸ°ûÅàÑøµÄÒªÇó£¬ÓÖÄÜÓÐЧ¿Ë·þʹÓÃѪÇåËù´øÀ´ÎÊÌâµÄÄ¿µÄ¡£

ÎÞѪÇåÅàÑø»ùÖÐͨ³£ÐèÒªÌí¼ÓһЩ¶îÍâµÄ×é·Ö£¬²ÅÄÜ°ïÖúϸ°ûÌù±ÚÉú³¤£¬°üÀ¨ÒÔϼ¸´óÀàÎïÖÊ£º

1£©´ÙÌù±ÚÎïÖÊ£ºÒ»°ãΪϸ°ûÍâ»ùÖÊ£¬ÈçÏËÁ¬µ°°×¡¢²ãÕ³Á¬µ°°×µÈ¡£ËüÃÇ»¹ÊÇÖØÒªµÄ·ÖÁÑËØÒÔ¼°Î¬³ÖÕý³£Ï¸°û¹¦Äܵķֻ¯Òò×Ó£¬¶ÔÐí¶àϸ°ûµÄ·±Ö³ºÍ·Ö»¯£¬Æð×ÅÖØÒª×÷Óá£ÏËÁ¬µ°°×Ö÷Òª´Ù½øÀ´×ÔÖÐÅß²ãϸ°ûµÄÌù±ÚÓë·Ö»¯£¬ÕâЩϸ°û°üÀ¨³ÉÏËάϸ°û¡¢ÈâÁöϸ°û¡¢Á£Ï¸°û¡¢ÉöÉÏƤϸ°û¡¢ÉöÉÏÏÙƤÖÊϸ°û¡¢CHOϸ°û¡¢³É¼¡Ï¸°ûµÈ¡£

2£©´ÙÉú³¤Òò×Ó¼°¼¤ËØ£ºÕë¶Ô²»Í¬Ï¸°ûÌí¼Ó²»Í¬µÄÉú³¤Òò×Ó¡£¼¤ËØÒ²ÊǴ̼¤Ï¸°ûÉú³¤¡¢Î¬³Öϸ°û¹¦ÄܵÄÖØÒªÎïÖÊ£¬ÓÐЩ¼¤ËØÊÇÐí¶àϸ°û*µÄ£¬ÈçÒȵºËØ¡£

3£©Ã¸ÒÖÖƼÁ£ºÅàÑøÌù±ÚÉú³¤µÄϸ°û£¬ÐèÒªÓÃÒÈøÏû»¯´«´ú£¬ÔÚÎÞѪÇåÅàÑø»ùÖÐÐ躬øÒÖÖƼÁ£¬ÒÔÖÕֹøµÄÏû»¯×÷Ó㬴ﵽ±£»¤Ï¸°ûµÄÄ¿µÄ¡£-³£ÓõÄÊÇ´ó¶¹ÒÈøÒÖÖƼÁ¡£

4£©½áºÏµ°°×ºÍתÔ˵°°×£º³£¼ûÈçתÌúµ°°×ºÍţѪÇå°×µ°°×¡£Å£ÑªÇå°×µ°°×µÄÌí¼ÓÁ¿±È½Ï´ó£¬¿ÉÔö¼ÓÅàÑø»ùµÄÕ³¶È£¬±£»¤Ï¸°ûÃâÊÜ»úеËðÉË¡£Ðí¶àÐýתʽÅàÑøµÄÎÞѪÇåÅàÑø»ù¶¼º¬ÓÐţѪÇå°×µ°°×¡£

5£©Î¢Á¿ÔªËØ£ºÎøÊÇ-³£¼ûµÄ¡£


1.5¡¢ÎÞµ°°×ÎÞѪÇåϸ°ûÅàÑø»ùÓ뻯ѧ×é·ÝÏÞ¶¨ÎÞѪÇåϸ°ûÅàÑø»ù

1£©ÎÞµ°°×ÎÞѪÇåϸ°ûÅàÑø»ù£¨protein free midium,PFM£©

ÕâÀàÅàÑø»ùÍêÈ«²»º¬Óж¯ÎïÀ´Ô´µ°°×£¬µ«ÈÔÓв¿·ÝÌí¼ÓÎïÊÇÖ²Îïµ°°×µÄСˮ½âƬ¶Î»òºÏ³É¶àëÄƬ¶Î£¬ÒÔ¼°Àà¹Ì´¼¼¤ËغÍÖ¬ÀàÇ°ÌåµÈ£¬ÒÔÌæ´ú¶¯ÎDËØ¡¢Éú³¤Òò×ÓµÄ×÷Óá£ÆäÌصãÊÇÍêȫûÓе°°×»òµ°°×º¬Á¿¼«µÍ£¬ÓÐÀûÓÚÉúÎïÖÆÆ·µÄ·ÖÀë´¿»¯¡£

2£©»¯Ñ§×é·ÝÏÞ¶¨ÎÞѪÇåϸ°ûÅàÑø»ù£¨Chemically defined media,CDM£©

´ËÀàÅàÑø»ùÊÇÄ¿Ç°-°²È«¡¢-ΪÀíÏëµÄÎÞѪÇåϸ°ûÅàÑø»ù£¬ËùÓгɷݵÄŨ¶È¶¼ÍêÈ«Ã÷È·£¬¼´Ê¹ÆäËùÌí¼ÓµÄÉÙÁ¿µ°°×£¬Ò²Êǿɾ­¹ý´¿»¯´¦Àí£¬³É·ÝÃ÷È·¡¢Å¨¶ÈÈ·¶¨µÄµ°°×¡£ÕâÀàÅàÑø»ù½ÏΪÀíÏëµØ¼õÉÙÁËÉú²úµÄ¿É±äÐÔ£¬Ìá¸ßÁËÉú²ú¹¤ÒÕµÄÖظ´ÐÔ£¬²¢ÓÐЧ½µµÍÁË´¿»¯³É±¾¡£


1.6¡¢¸öÐÔ»¯Ï¸°ûÅàÑø»ù

ÑϸñÒâÒåÉÏÀ´Ëµ£¬¸öÐÔ»¯Ï¸°ûÅàÑø»ù²»ÔÚϸ°ûÅàÑø»ùµÄ´«Í³·ÖÀàÖ®ÁУ¬Æä¾ßÌåÊÇÖ¸Ò»Àà¸ù¾Ýϸ°ûÌØÐÔ¡¢Ï¸°ûÅàÑø¹¤ÒÕÌص㡢ʹÓÃÕßÐèÇóÏ°¹ß¶øÁ¿Éí¶¨ÖƵÄϸ°ûÅàÑø»ù£¬Ö÷ҪĿµÄÊÇÌá¸ßϸ°û²úÂÊ¡¢²úÆ·ÖÊÁ¿¡¢²úÆ·°²È«ÐԺͽµµÍѪÇåµÄʹÓõÈ¡£¸öÐÔ»¯Ï¸°ûÅàÑø»ù¿ÉÄÜÊÇÎÞѪÇåÅàÑø»ù£¬Ò²¿ÉÄÜÊǵÍѪÇåÅàÑø»ù£¬ÖÕÊÇΪÂú×ãijһÖÖ»òijһÀàÉúÎïÖÆÆ·µÄÉú²úÐèÇó¡£


2¡¢ÅàÑø»ùµÄ»ù±¾×é·Ö

ϸ°ûÅàÑø»ù±ØÐ뺬Óгä·ÖµÄÓªÑøÎïÖÊ£¬²ÅÄÜÂú×ãÐÂϸ°ûºÏ³É¡¢Ï¸°û´úлµÈÉú»¯·´Ó¦ËùÐèÒªµÄÎïÖʺÍÄÜÁ¿¡£Ï¸°ûÅàÑø»ùµÄÖ÷Òª³É·ÝÊÇË®¡¢°±»ùËᡢάÉúËØ¡¢Ì¼Ë®»¯ºÏÎï¡¢ÎÞ»úÑκÍÆäËüһЩ¸¨ÖúÓªÑøÎïÖʵÈ¡£´ËÍ⣬»¹¿ÉÄܺ¬ÓÐѪÇ塢ѪÇåÌæ´ú³É·Ö¡¢pHָʾ¼ÁµÈ¡£


2.1¡¢Ë®

Ë®ÊÇϸ°ûµÄÖ÷Òª³É·Ý£¬Ò²ÊÇϸ°ûÀµÒÔÉú´æµÄÖ÷Òª»·¾³¡£Ï¸°ûÅàÑøÒºÖÐ90%ÒÔÉϵijɷÝÊÇË®¡£Ï¸°û¶ÔË®µÄÆ·Öʷdz£Ãô¸Ð£¬Ë®µÄÆ·Öʽ«Ö±½ÓÓ°Ïìϸ°ûÅàÑøµÄЧ¹û¡£¶øË®ÖÐͨ³£º¬ÓÐÖؽðÊô¡¢ÂÈ¡¢Áס¢ÓлúÎï¡¢ÈÈÔ­µÈÎÛȾÎϸ°ûÅàÑøÓÃË®Ðë¾­¹ý´¿»¯£¬Æ·ÖÊÓ¦·ûºÏÖйúÒ©µä×¢ÉäÓÃË®±ê×¼»òÕß³¬´¿Ë®µÄ±ê×¼¡£


2.2¡¢ÄÜÔ´ºÍ̼Դ

ÄÜÔ´ºÍ̼ԴÊÇÓÃÓÚά³Öϸ°ûÉúÃüºÍÖ§³Öϸ°ûÉú³¤£¬Ö÷Òª°üÀ¨ÌÇ¡¢ÌǽͽâµÄ²úÎïºÍ¹È°±õ£°·£¬ÆäËû°±»ùËáÊÇ´ÎÒªµÄÄÜÔ´ºÍ̼ԴÎïÖÊ¡£Ï¸°ûÄܹ»ÀûÓõÄÌÇÀàÖ÷ÒªÊÇÁù̼ÌÇ£¬Ä¿Ç°´ó¶àÌåÍâÅàÑøʱѡȡÆÏÌÑÌÇ×÷Ϊϸ°ûµÄÖ÷Ҫ̼ԴºÍÄÜÁ¿À´Ô´£¬Òò´Ëϸ°ûÅàÑø»ùÖлù±¾¶¼º¬ÓÐÆÏÌÑÌÇ£¬º¬Á¿Ò»°ãΪ5¡«25 mmol/L¡£

ÔÚÆÏÌÑÌÇŨ¶È½Ï¸ßʱ£¬Ï¸°ûÖ÷Ҫͨ¹ýÀ©É¢×÷ÓÃÎüÊÕÆÏÌÑÌÇ£¬Ï¸°ûĤÄÚÍâµÄÆÏÌÑÌÇŨ¶ÈÌݶÈÊÇϸ°ûÎüÊÕÆÏÌÑÌǵĶ¯Á¦£»ÔÚÆÏÌÑÌÇŨ¶È½ÏµÍʱ£¬Ö÷ÒªÓÉÄÆÀë×ÓÍƶ¯µÄ¸ßÇ׺ÍÐÔתÔ˹ý³Ìʹϸ°ûÉãÈ¡ÆÏÌÑÌÇ¡£ÆÏÌÑÌǽøÈëϸ°ûºó²ÎÓëÌǽͽâ¡¢ºËËá´úл¡¢ÌÇÔ­ºÏ³É¡¢ÄÜÁ¿´úлÒÔ¼°Ò»Ð©°±»ùËáµÄºÏ³É¡£ÓëÌåÄÚµÄÄÜÁ¿¹©Ó¦Í¾¾¶²»Í¬£¬ÌåÍâÅàÑøʱ£¬Ò»¶¨µÄŨ¶È·¶Î§Ìõ¼þÏ£¬ÆÏÌÑÌÇÖ÷Òª¾­ÌǽͽâÑ­»·×ª»¯³ÉÈéËáÀ´ÎªÏ¸°ûÌṩÄÜÁ¿¡£


2.3¡¢µªÔ´£¨°±»ùËᣩ

°±»ùËáÔÚϸ°ûÄÚµÄÖØÒªÉúÀí×÷ÓÃÖ÷ÒªÌåÏÖÔÚÒÔϼ¸¸ö·½Ã棺

¢ÙÊǵ°°×ÖʵĻù±¾×é³Éµ¥Î»£¬ÓÃÓںϳɵ°°×ÖʺͶàëÄ£»

¢Ú¿ÉÓÃÓںϳÉijЩ¾ßÓÐÖØÒªÉúÀí×÷Óõ嬵ª»¯ºÏÎÈçºËËá¡¢Äá¿Ëõ£°·µÈ£»

¢ÛijЩ°±»ùËỹ¾ßÓжÀÌصÄÉúÀí×÷Óã¬Èç¸Ê°±Ëá²ÎÓëÉúÎïת»¯×÷Ó㬱û°±ËáºÍ¹È°±õ£°·²ÎÓëϸ°ûÄÚ°±µÄÔËÊäµÈ£»

¢Ü¿Éת±ä³ÉÌÇÀàºÍÖ¬·¾£¬²ÎÓëÑõ»¯¹©ÄÜ¡£

ϸ°ûËùÄÜÀûÓõݱ»ùËáÊÇLÐÍͬ·ÖÒì¹¹Ì壬DÐÍ°±»ùËá²»Äܱ»ÀûÓᣲ»Í¬µÄϸ°û¶Ô°±»ùËáµÄÐèÇó¸÷Ò죬µ«ÓÐЩ±ØÐè°±»ùËáÊÇϸ°û²»ÄÜ×ÔÉíºÏ³ÉµÄ£¬±ØÐëÒÀ¿¿ÍâÔ´µÄϸ°ûÅàÑøÒºÌṩ¡£ÆäÓà·Ç±ØÐè°±»ùËᣬϸ°û¿ÉÒÔ×Ô¼ººÏ³É£¬»òͨ¹ýת°±×÷ÓÃÓÉÆäËûÎïÖÊת»¯¶øÀ´£¬µ«ÊÇÔÚϸ°ûÅàÑø»ùÖÐÌí¼ÓÊʵ±Å¨¶ÈµÄ·Ç±ØÐè°±»ùËá¿ÉÒÔ¼õÇáϸ°ûÔںϳɷ½ÃæµÄ¸ºµ££¬Ìá¸ß¹È°±õ£°·¼°ÆäËü±ØÐè°±»ùËáµÄÀûÓÃÂÊ¡£

¾ø´ó²¿·Öϸ°û¶Ô¹È°±õ£°·ÓнϸߵÄÒªÇ󣬿ÉÄÜÒòÆä²»½öÊÇϸ°ûµÄÖ÷ÒªµªÔ´£¬ÇÒ¿É×÷Ϊϸ°ûÉú³¤µÄÄÜÔ´ÎïÖʺÍàÑßÊ¡¢à×ऺËÜÕËáµÄÇ°Ì壬ÁíÍ⻹¿ÉÖ±½Ó×÷Ϊϸ°ûÔöÖ³ºÍ²úÎïºÏ³ÉÖеĵ°°×ÖʺͶàëĵÄ×é³É³É·Ö¡£ÔÚȱÉٹȰ±õ£°·Ê±£¬Ï¸°û»áÉú³¤²»Á¼£¬ÉõÖÁËÀÍö¡£ÓÉÓڹȰ±õ£°·¾ßÓжàÖÖÉúÀí×÷Óã¬ÌåÍ⶯Îïϸ°ûÅàÑøʱÐèÒª´óÁ¿¹È°±õ£°·£¬ÀûÓÃÁ¿³£³¬¹ýÆäËû±ØÐë°±»ùËáÀûÓÃÁ¿µÄ×ܺÍ¡£


2.4¡¢Î¬ÉúËØ

άÉúËØÊÇά³Öϸ°ûÉú³¤µÄÉúÎï»îÐÔÎïÖÊ£¬ÔÚϸ°û´úлÖÐÆðµ÷½Ú¼°¿ØÖÆ×÷Óá£Î¬ÉúËØ¿É·ÖΪˮÈÜÐÔºÍÖ¬ÈÜÐÔÁ½À࣬ˮÈÜÐÔάÉúËØÖ÷Òª°üÀ¨·ºËᡢάÉúËØB12¡¢Ò¶Ëá¡¢ÑÌõ£°·¡¢ßÁ¶ßÈ©¡¢Áò°·ËØ¡¢ºË»ÆËØ¡¢Î¬ÉúËØC¡¢µ¨¼î¡¢¼¡´¼µÈ£»Ö¬ÈÜÐÔάÉúËØÖ÷Òª°üÀ¨Î¬ÉúËØA¡¢D¡¢E¡¢KµÈ£»ÓеÄÅàÑøÒºÖл¹Ö±½Ó²ÉÓÃATPºÍ¸¨Ã¸A£»´ó²¿·ÖÅàÑø»ùÖл¹ÓÐÉúÎïËØ¡£

Ðí¶àάÉúËزÎÓë¹¹³É¸÷ÖÖøµÄ»îÐÔ»ùÍŵijɷÖ£¬Ã»ÓÐËüÃÇ£¬Ã¸±ãûÓлîÐÔ£¬´úл»î¶¯½«ÎÞ·¨½øÐС£±ÈÈ磬·ºËá¿ÉÒÔÔÚϸ°ûÄÚת±ä³Éõ£»ùÔØÌåµ°°×ºÍ¸¨Ã¸£¨È縨øA£©£¬²ÎÓëÌÇÀà¡¢Ö¬ÀàºÍµ°°×ÖÊ´úлÖеĴ߻¯·´Ó¦£»Î¬ÉúËØB12ÔòÔÚϸ°ûÄÚ²ÎÓëÒ¶ËáµÄºÏ³ÉºÍÖ¬·¾ËáµÄºÏ³ÉµÈ¡£²»Í¬Åä·½µÄϸ°ûÅàÑø»ùÖÐάÉúËصÄŨ¶ÈÓнϴó²îÒì¡£ÀýÈ磬DMEMÅàÑø»ùÖÐάÉúËصĺ¬Á¿Ô¼ÎªMEMÅàÑø»ùµÄÁ½±¶£¬ÆäÔ­ÒòÊÇÒ»·½Ã治ͬÖÖÀàάÉúËصÄ×÷Óò»Í¬£¬ÁíÒ»·½Ã治ͬÖÖÀàµÄϸ°û¶ÔάÉúËصÄÐèÇóÒ²¿ÉÄÜÓнϴó²îÒ죬ÏàӦϸ°ûÅàÑø»ùµÄÅä·½ÖÐάÉúËصĺ¬Á¿Ò²¿ÉÄܲ»Í¬¡£


2.5¡¢ÎÞ»úÑÎ

ÎÞ»úÑÎÊÇϸ°ûά³ÖÉúÃü»î¶¯Ëù²»¿ÉȱÉÙµÄÓªÑø³É·Ö£¬Ö÷ÒªÓÐNa+¡¢K+¡¢Ca2+¡¢Mg2+¡¢Cl£­¡¢PO43¡ª¡¢SO42¡ª¡¢HCO3£­µÈ£¬Ö÷Òª×÷ÓÃΪά³Öϸ°ûÅàÑøÒºÉø͸ѹƽºâ£¬²ÎÓëϸ°ûµÄ´úл»î¶¯¡£´ËÍ⣬ͨ¹ýÌṩÄÆ£¬K+ºÍCa2+£¬°ïÖúϸ°ûµ÷½Úϸ°ûĤ¹¦ÄÜ¡£Na+ÊÇϸ°ûÍâÒºÖÐÖ÷ÒªµÄÑôÀë×Ó£¬¶Ôά³ÖÉø͸ѹµÄºã¶¨Óоö¶¨ÐÔµÄ×÷Ó㬻¹ÓëCl£­¹²Í¬²ÎÓëÉúÎïµç»î¶¯¡¢Î¬³ÖˮƽºâºÍËá¼îƽºâµÈ¡£K+Ö÷Òª·Ö²¼ÔÚϸ°ûÄÚÒº£¬¶ÔÓÚ¼¤»îijЩøÊDZØÐèµÄ£¬²¢ÔÚµ÷½Úϸ°ûÄÚ»·¾³µÄËá¼îƽºâÉÏÒ²Óм«ÖØÒªÒâÒå¡£Ca2+ºÍMg2+Ö÷Òª²ÎÓëÐźŴ«µ¼¡¢ÄÜÁ¿´úл¡¢Ö¬·¾ËáºÏ³É¡¢ºËÌÇÌåÎȶ¨ºÍµ°°×ÖʺϳɵȶàÖÖÉúÀí×÷Óá£PO43£­¡¢SO42£­¡¢HCO3£­ÊÇ»ùÖÊËùÐèÒõÀë×Ó£¬Í¬Ê±ÊÇϸ°ûÄÚµçºÉµÄµ÷½ÚÕß¡£Á׶ÔÓÚϸ°ûµÄÉú³¤¡¢´úлºÍµ÷¿Ø¶¼ÓÐÖØÒªµÄ×÷Ó㬺¬Á׵Ļ¯ºÏÎïÈçºËËá¡¢Á×Ö¬¡¢µ°°×ÖÊÊǹ¹³Éϸ°ûµÄÖ÷Òª³É·Ö£¬ATP¡¢ADPÊÇÄÜÁ¿Éú³É¡¢´æ´¢ºÍÀûÓõIJ»¿É»òȱµÄ»¯ºÏÎï¡£

ÉÏÊöÀë×Ó¶ÔÓÚϸ°ûµÄ×÷Óø÷Óв»Í¬£¬ËüÃǹ²Í¬¹¹³ÉÁËϸ°ûÀµÒÔÉú´æµÄÉø͸ѹ¡¢pHºÍµç»¯Ñ§Æ½ºâµÄ΢»·¾³£¬Ï¸°û¶ÔÓÚijÖÖÔªËصÄÎüÊÕÀûÓûáÊܵ½ÆäËüÔªËصĸÉÈÅ£¬ÀýÈçÅàÑø»ùÖйý¸ßµÄ¸ÆÀë×ÓŨ¶È»áʹþºÍпµÄÎüÊÕÀûÓÃÊܵ½¸ÉÈÅ¡£Òò´Ë£¬ÔÚ±£Ö¤ÅàÑø»ùÖÐÉÏÊöÀë×ÓŨ¶ÈÂú×ãÒªÇóÒÔÍ⣬»¹Ðè±£Ö¤ÉÏÊöÀë×ÓÖ®¼äÖÖÀàºÍ±ÈÀýµÄƽºâ¡£

´ËÍ⣬΢Á¿ÔªËØÈçÌú¡¢îÜ¡¢Äø¡¢Îø¡¢dian¡¢Í­¡¢Ð¿¡¢ÃÌ¡¢¸õ¡¢îâ¡¢·úµÈ¶ÔÓÚϸ°ûÉú³¤´úлºÍ²úÎïºÏ³É¶¼Óдٽø×÷Óá£Î¢Á¿ÔªËØÔÚϸ°ûÄÚͨ³£ÒÔÓëÓлúÎï½áºÏµÄÐÎʽ´æÔÚ¡£ÆäÖÐÌúÔÚϸ°ûÖвÎÓëÑõµÄתÔË£»îÜÊÇάÉúËØB12µÄ×é³É²¿·Ö£¬²ÎÓëÒ¶ËáµÄºÏ³ÉºÍÖ¬·¾ËáµÄºÏ³É£»ÄøÄܹ»¼¤»îÍÑÑõºËÌǺËËáø¡¢ÒÒõ£¸¨Ã¸AºÏ³ÉøµÈÔÚϸ°ûÄÚ¾ßÓÐÖØÒª¹¦ÄܵÄø£¬»¹¾ßÓÐÎȶ¨ºËËá½á¹¹µÄ¹¦ÄÜ£»ÑÇÎø-ËáÄÆÖеÄÎø£¬×÷Ϊ¹Èë׸ÊëĹýÑõ»¯ÎïøµÄ¸¨»ù£¬¾ßÓп¹¹ýÑõ»¯ÎïÄÜÁ¦£¬²ÎÓëÏû³ýϸ°ûÄÚµÄÖ¬·¾Ëá¹ýÑõ»¯ÎÌá¸ßϸ°ûµÄÉú³¤ËÙÂʺͻîÐÔ¡£


2.6¡¢ÆäËûÌí¼Ó³É·Ö

ÔÚµÍѪÇå¡¢ÎÞѪÇåϸ°ûÅàÑø»ùÖУ¬ÎªÂú×ãϸ°ûÉú³¤ÔöÖ³ÐèÒª£¬³£³£Ìí¼ÓһЩ³É·Ý£ºµ°°×ÖÊ¡¢¶àëÄ¡¢ºËÜÕ¡¢àÑßÊ¡¢ÄûÃÊËáÑ­»·µÄÖмä²úÎï¡¢Ö¬Àà¡¢¼°Ò»Ð©ÑªÇåÌæ´úÒò×ӵȡ£ÆäÖе°°×ÖʾßÓÐÖØÒªµÄ×÷Ó㬶¯Îïϸ°û¶ÔÐí¶àÎïÖÊ£¨ÄÑÈÜÓÚË®µÄÀë×Ó»òÖ¬ÀàÎïÖÊ£©µÄÉãÈ¡ÐèÒª½èÖúµ°°×ÖʵĴ«µÝ×÷Óã¬Èç°×µ°°×¡¢´«µÝµ°°×¡¢Ìù±Úµ°°×µÈÄܹ»Ð¯´øÖ¬·¾Ëá¡¢¼¤ËØ¡¢¿óÎïÖʵȴٽøϸ°ûÉú³¤¡£×ªÌúµ°°×ÊÇÒ»ÖÖÖØÒªµÄ´«µÝµ°°×£¬Äܹ»½áºÏÌú£¬´Ù½øϸ°û¶ÔÌúÀë×ÓµÄÎüÊÕ£¬²¢¾ßÓнⶾ×÷Óã¬Æä´ÙÉú³¤×÷ÓÿÉÄÜÓëÆä¾ßÓÐÉú³¤Òò×ӵŦÄÜÓйØ¡£ÒȵºËØ¿É´Ù½øϸ°û¶ÔÆÏÌÑÌǺͰ±»ùËáµÄÀûÓã¬ÉÌÒµ»¯ÖÐһЩÉú³¤Òò×ÓÒÔÖØ×éµ°°×ÐÎʽÌí¼Óµ½ÅàÑø»ùÖУ¬Ö÷ÒªÓÃÀ´´Ì¼¤Ï¸°ûÔöÖ³£¬²¢¿É´Ù½øÌÇÔªºÍÖ¬·¾ËáµÄºÏ³É¡£ÒÒ´¼°·ÊÇÒ»ÖÖÖØÒªµÄ´Ì¼¤Ï¸°ûÉú³¤µÄ»¯ºÏÎÊÇÄÔÁ×ËáµÄºÏ³ÉÇ°Ìá¡£

ÁíÍ⣬·Óºì×÷ΪpHÖµµÄָʾ¼Á±»¼ÓÈ뵽ϸ°ûÅàÑø»ùÖС£·ÓºìÔÚ²úÎï´¿»¯¹ý³ÌÖлáÔì³É¸ÉÈÅ£¬²¢ÇÒ¾ßÓÐÒ»¶¨µÄ¹Ì´¼À༤ËØÑù×÷Óã¬Èç´Æ¼¤ËØÑù×÷Óᣵ±ÓÃÓÚ²¸ÈéÀදÎïϸ°ûµÄÅàÑø£¬¿ÉÄܻᷢÉúһЩ¹Ì´¼Àà·´Ó¦¡£ÏÖÔÚÉÌÒµ»¯Ï¸°ûÅàÑø»ùÖеķӺ캬Á¿¿É¸ù¾ÝÐèÇóµ÷Õû¡£ÒòÉúÎï·´Ó¦Æ÷¾ßÓÐpHÔÚÏß¼ì²â¼¼Êõ£¬ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑø¶¯Îïϸ°ûʱ£¬·Óºì¿ÉÍêÈ«È¥³ý¡£


2.7¡¢±£»¤¼Á

ϸ°û±£»¤¼ÁÊDZ£»¤Ï¸°ûÃâÊÜÉø͸ѹ±ä»¯¡¢¼ôÇÐÁ¦¡¢Ñõ»¯¼°ÆøÅÝ×÷ÓõÈÒýÆðµÄËðÉ˵ÄÎïÖÊ¡£ÔÚʹÓÃÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑø¶¯Îïϸ°ûʱ£¬Ï¸°ûÒ×±»»úе½Á°èºÍͨÆø¹ÄÅݲúÉúµÄÁ÷Ìå¼ôÇÐÁ¦ºÍÆøÅÝ×÷ÓÃËùÉ˺¦ÉõÖÁÆÆËðËÀÍö¡£Îª½µµÍÕâÖÖËðÉË£¬³ýÓÅ»¯ÉúÎï·´Ó¦Æ÷½á¹¹ºÍÉú²ú¹¤ÒÕÍ⣬¿ÉÔÚϸ°ûÅàÑøÒºÖÐÌí¼ÓһЩ±£»¤¼Á¡£ÆäÖ÷ÒªÊÇͨ¹ý¸Ä±äϸ°ûÅàÑø»ùÎïÐÔ»òÊǶÔϸ°û¾ßÓб£»¤×÷ÓõÄÎïÖÊ£¬³£ÓõÄÖÖÀàÓÐѪÇå¡¢°×µ°°×¡¢¾ÛÒѶþ´¼£¨PEG£©¡¢·ÇÀë×ÓÐÔ±íÃæ»îÐÔ¼ÁPluronicF68»òÊÇÆäËûһЩ¸ß·Ö×Ó¾ÛºÏÎïµÈ¡£


3¡¢Ï¸°ûÅàÑø»ùµÄÀí»¯ÐÔÖÊ

¶¯Îïϸ°ûÔÚϸ°ûÅàÑø»ùÖв»½öÄÜ´æ»î£¬»¹Òª·ÖÁÑÔöÖ³£¬ºÏÊʵÄÉø͸ѹ¡¢pHÖµµÈÀí»¯ÐÔÖÊÊÇϸ°ûÅàÑø»ù±ØÐë¾ß±¸µÄÇ°ÌáÌõ¼þ¡£


3.1¡¢pH

¶¯Îïϸ°û´ó¶àÊýÐèÒªÇá΢µÄ¼îÐÔÌõ¼þ£¬ÊÊÒËpHÔÚ7.2¡«7.4Ö®¼ä¡£Ï¸°ûÅàÑø»ùµÄpHֵͨ³£Ð辭УÕýµÄpH¼ÆÀ´²â¶¨¡£ÔÚϸ°ûÉú³¤¹ý³ÌÖУ¬Ëæϸ°ûÊýÁ¿µÄÔö¶àºÍ´úл»î¶¯µÄ¼ÓÇ¿£¬¶þÑõ»¯Ì¼²»¶Ï±»ÊÍ·Å£¬ÅàÑøÒº±äËᣬpHÖµ·¢Éú±ä»¯¡£·ÓºìÊÇϸ°ûÅàÑø»ùÖÐ-³£ÓõÄpHָʾ¼Á£¬µ«ÒÀ¿¿Ï¸°ûÅàÑø»ùÖеķӺìµÈpHָʾ¼Á½øÐÐÅжÏ£¬ÐèҪʵÑéÔ±µÄ¾­Ñé»ýÀÛ£¬´æÔڽϴóµÄÖ÷¹ÛÐÔ¡£Êµ¼ÊÉÏ£¬¸öÐÔ»¯Ï¸°ûÅàÑø»ù»òÊÇÎÞѪÇåϸ°ûÅàÑø»ùÖзӺ캬Á¿½ÏÉÙ»òÊDz»º¬·Óºì£¬Ö»ÄÜͨ¹ýpH¼Æ»òÕßpHµç¼«½øÐÐpHÖµµÄ¼ì²â£¬½á¹û¸üΪ׼ȷ¿É¿¿¡£


3.2¡¢»º³åÄÜÁ¦

ϸ°ûÅàÑø»ùÓ¦¾ßÓÐÒ»¶¨µÄ»º³åÄÜÁ¦¡£Ï¸°ûÅàÑø¹ý³ÌÖÐÔì³Éϸ°ûÅàÑøÒºpH²¨¶¯µÄÖ÷ÒªÎïÖÊÊÇϸ°û´úл²úÉúµÄCO2¡£ÔÚ·â±ÕʽÅàÑø¹ý³ÌÖÐCO2ÓëË®½áºÏ²úÉú̼Ëᣬϸ°ûÅàÑøÒºpHºÜ¿ìϽµ£»´ò¿ªÅàÑøÆ÷¾ßʱCO2ÒݳöÔò»áÒýÆðpHÉý¸ß¡£Ï¸°ûÅàÑø»ùͨ³£²ÉÓÃNaHCO3-CO2»º³åϵͳ£¬°´ÏÂÁл¯Ñ§·´Ó¦·½³Ìʽµ÷½Úϸ°ûÅàÑø»ùµÄpHÖµ£º

H2O+CO2¡úH2CO3?H++HCO3£­

NaHCO3?Na++HCO3£­

´ËÍ⣬»¹Óлº³åÄÜÁ¦½Ï¸ßµÄÁ×ËáÑλº³åϵͳ¡£µ«Ì¼ËáÑλº³åϵͳµÄϸ°û¶¾ÐÔС¡¢³É±¾µÍ£¬ÔÚϸ°ûÅàÑøÖÐÓ¦ÓõøüΪ¹ã·º¡£ÁíÒ»ÖÖ½ÏΪ³£ÓõĻº³åÒºÊÇHEPES£¨ôÇÒÒ»ùßß-àºÒÒÁò»ÇËᣩҺ£¬ËüÊÇÒ»ÖÖ·ÇÀë×ÓÁ½ÐÔ»º³åÒº£¬ÔÚpH 7.0~7.2·¶Î§ÄÚ¾ßÓнϺõĻº³åÄÜÁ¦¡£¸ßŨ¶ÈµÄHEPES¿ÉÄܶÔϸ°ûÓж¾ÐÔ×÷Óã¬Ï¸°ûÅàÑøʱHEPESµÄÌí¼ÓŨ¶ÈÒ»°ãΪ10¡«25 mmol/L¡£


3.3¡¢Éø͸ѹ

ϸ°û±ØÐëÉú»îÔÚµÈÉøµÄ»·¾³ÖУ¬´ó¶àÊýÌåÍâÅàÑøµÄϸ°û¶ÔÉø͸ѹÓÐÒ»¶¨ÄÍÊÜÐÔ¡£Ñо¿ÏÔʾ£¬¶ÔÓÚ´ó¶àÊý²¸ÈéÀදÎïϸ°û£¬Éø͸ѹÔÚ260¡«320 mOsm/kgµÄ·¶Î§ÄÚ¶¼ÊÊÒË¡£ÔÚÉú²ú¡¢ÅäÖÆϸ°ûÅàÑø»ùµÄ¹ý³ÌÖУ¬Éø͸ѹµÄ²â¶¨½ÏΪÖØÒª£¬ÓÐÖúÓÚ·ÀÖ¹ÔÚÉú²ú¡¢ÅäÖƹý³ÌÖгöÏÖ³ÆÁ¿µÈ·½ÃæµÄ´íÎó¡£·´Ó¦Æ÷¸ßÃܶÈÅàÑø¶¯Îïϸ°û¹ý³Ì£¬ÔÚÌí¼Ó̼ËáÇâÄƵĹý³ÌÖÐ×¢ÒâÉø͸ѹµÄ¼à¿Ø£¬·ÀÖ¹Éø͸ѹ¹ý¸ß¶Ôϸ°ûµÄË𺦡£


3.4¡¢Î¶È

ζȶÔϸ°ûÅàÑø»ùÓнϴóµÄÓ°Ï죬ζȹý¸ß¿ÉÒýÆðÓªÑø³É·ÝµÄ½µ½â»òÆÆ»µ£¬Ï¸°ûÅàÑø»ùµÄpH¡¢Àë×ÓÇ¿¶ÈºÍµç½â³£ÊýpKaÒ²¿ÉÄÜÊܵ½Ó°Ïì¡£Èçϸ°ûÅàÑøÒºÖеĹȰ±õ£°·£¬ÔÚ¸ßÎÂÌõ¼þϽµ½âµÄËٶȽϿ죬Èç35¡æÖü´æʱ£¬·ÅÖÃ3Ìì½µ½â25%×óÓÒ£¬ÔÚ4¡æÖü´æ3Öܽµ½âÔ¼20%¡£


3.5¡¢Õ³ÖÍÐÔ¼°±íÃæÕÅÁ¦

º¬ÑªÇåϸ°ûÅàÑøÒºµÄÕ³ÖÍÐÔÖ÷ÒªÊÇÓÉѪÇåÒýÆðµÄ£¬ÔÚתƿÅàÑøÌù±Úϸ°ûʱ£¬ÅàÑøÒºµÄÕ³ÖÍÐÔ¶Ôϸ°ûÉú³¤Ã»Óжà´óÓ°Ï죻µ«ÔÚÉúÎï·´Ó¦Æ÷Ðü¸¡ÅàÑøϸ°ûʱ£¬Ï¸°ûÅàÑøÒºµÄÕ³ÖÍÐÔÔòÖ±½ÓÓ°Ïì½Á°èתËÙ¿ØÖƼ°½Á°è¼ôÇÐÁ¦¶Ôϸ°ûÔì³ÉµÄËðÉ˳̶È¡£

±íÃæÕÅÁ¦¶Ôϸ°ûÅàÑøÓнϴóµÄ×÷Óã¬ÓÈÆäÔÚÀûÓÃÉúÎï·´Ó¦Æ÷½øÐÐÐü¸¡ÅàÑøʱ£¬½Á°èºÍͨÆø¶¼»áÒýÆðÅÝÄ­µÄ²úÉú¡£¶ÔÓÚº¬ÑªÇåÅàÑøÒº£¬ÓÉÓÚѪÇåÖжàÖÖµ°°×µÄ´æÔÚ£¬½Á°èʱ²úÉúµÄÆøÅݽ϶࣬ÆøÅݵÄÉÏÉýÔ˶¯¶Ôϸ°ûµÄËðÉ˳̶Ȼ¹ÓÐÕùÒ飬µ«ÆøÅݵÄÆÆÁѶÔϸ°ûÓÐÃ÷ÏÔµÄËðÉË×÷Óá£Îª½µµÍÕâÖÖËðÉË£¬¿Éͨ¹ýÔÚϸ°ûÅàÑø»ùÖÐÌí¼ÓһЩ±£»¤¼Á£¬½µµÍϸ°û-ÆøÌåºÍϸ°û-ÒºÌåµÄ±íÃæÕÅÁ¦£¬¼õÉÙÆøÅݵÄÐγÉ¡£


4¡¢Ï¸°ûÅàÑø»ùµÄÃð¾ú¼°´¢´æ


4.1¡¢²»Í¬Ï¸°ûÅàÑø»ùµÄ³ý¾ú·½Ê½¼°×¢ÒâÊÂÏî

ϸ°ûÅàÑø»ùÃð¾úµÄ·½Ê½·ÖΪ¸ßѹÃð¾úºÍĤ¹ýÂ˳ý¾ú£¬²»Í¬µÄÅàÑø»ùÓÉÓÚÆäÓªÑø³É·Ý²»Í¬£¬Ãð¾ú·½Ê½Ò²¿ÉÄܲ»Í¬¡£

¢Ù¸ßѹÃð¾ú

ijЩÅàÑø»ù£¨ÈçMEM£©¿É½øÐиßѹÃð¾ú£¬ÕâÀàÅàÑø»ùÒ»°ã²»º¬ÓÐL-¹È°±õ£°·ºÍ̼ËáÇâÄÆ£¬Ò»°ãÊÇÔÚÅàÑø»ù¸ßѹÃð¾úºó²Å¼ÓÈë¡£ÁíÍâ¿ÉÓÃÄ͸ßѹµÄ¹È°±ËáÑΣ¨ÈçL-±û°±õ£-L-¹È°±õ£°·£©´úÌæL-¹È°±õ£°·¡£¿É¸ßѹÃð¾úµÄÅàÑø»ùÔÚ121¡æ¡¢15 psi£¬15·ÖÖÓµÄÌõ¼þÏÂÍêÈ«¿É´ïµ½Ãð¾úЧ¹û¼°ÓªÑø³É·ÖµÄСËðʧ£¬²»Ð轫Ãð¾úʱ¼äÑÓ³¤¡£

¾ø´ó¶àÊýϸ°ûÅàÑø»ù²»ÊÊÒ˸ßѹÃð¾ú¡£ÒòÅàÑøÒºÖг£º¬ÓÐάÉúËØ¡¢µ°°×ÖÊ¡¢¶àëÄ¡¢Éú³¤Òò×ÓµÈÎïÖÊ£¬ÕâЩÎïÖÊÔÚ¸ßλòÉäÏßÕÕÉäÏÂÒ×·¢Éú±äÐÔ»òʧȥ¹¦ÄÜ£¬Òò¶øÉÏÊöÒºÌå¶à²ÉÓùýÂËÏû¶¾ÒÔ³ýȥϸ¾ú¡£¿É¹©¹ýÂËÃð¾úʹÓõÄÂËĤºÜ¶à£¬Æä²ÄÁ϶àΪpolyethersulphone£¨PES£©¡¢ÄáÁú¡¢¶à¾Û̼ËáÑΡ¢´×ËáÏËάËØ¡¢ÏõËáÏËάËØ¡¢PTFE¡¢Ìմɵȡ£Ä¤¹ýÂ˳ý¾úÊǵ±Ç°½ÏΪ³£Óü°±ã½ÝµÄÒ»ÖÖ·½·¨£¬³£²ÉÓÃ0.2¦Ìm¿×¾¶µÄÂËĤ£¬²¿·Ý²ÉÓÃ0.1¦Ìm¿×¾¶¡£Óë¸ßѹ¹ýÂË·½Ê½Ïà±È£¬ÂËĤ¾ßÓÐʹÓÃÆÚÏÞÇÒ¼Û¸ñ½Ï¸ß£¬µ«¶Ôϸ°ûÅàÑø»ùµÄÓªÑø³É·ÝÆÆ»µÐÔ½ÏС¡£


4.2¡¢²»Í¬Ï¸°ûÅàÑø»ù´æ´¢¹ý³ÌÖеÄ×¢ÒâÊÂÏî

ͨ³£ÒºÌåϸ°ûÅàÑø»ù±ÜÃâ-20¡æ¶³´æ£¬ÒòΪ½â¶³Ê±¿ÉÄÜ»áÓÐÓªÑø³É·ÝÎö³ö£¬Ó°ÏìÅàÑøЧ¹û¡£Õý³£Çé¿öÏÂÓÚ2~8¡æ±Ü¹â±£´æ£¬Ê¹ÓÃÇ°´Ó±ùÏäÈ¡³ö£¬·ÅÈëÊÒνøÐÐƽºâ¡£Í¨³£µÄÒºÌåÅàÑø»ùÓÐЧÆÚÊÇ6¸öÔµ½12¸öÔ¡£ÒºÌåϸ°ûÅàÑø»ù¾¡Á¿±ÜÃⳤÆÚÖü´æ£¬ÆäÖеĹȰ±õ£°·»áËæ×Å´¢´æʱ¼äµÄÑÓ³¤¶øÂýÂý·Ö½â£¬Èç¹ûϸ°ûÉú³¤²»Á¼£¬¿É¿¼ÂǼì²âÅàÑø»ùÖеĹȰ±õ£°·º¬Á¿È·¶¨ÊÇ·ñÔÙ²¹¼Ó¹È°±õ£°·¡£ÊÐÊÛÉÌÒµ»¯ÒºÌåϸ°ûÅàÑø»ùÓоßÌåµÄÓÐЧÆÚ£¬¶ÔÓÚʹÓøɷÛϸ°ûÅàÑø»ù×ÔÐÐÅäÖƳÉÒºÌåÒÔºó£¬Ò²Ó¦µÍΣ¨2~8¡æ£©Öü´æ¡£³ýÅàÑø»ùÖÐÈç¹È°±õ£°·Ò×½µ½âÖ®Í⣬ÅàÑø»ùÖеÄÆäËû³É·ÝËæ×ÅζȵÄÉý¸ßÒ²¿ÉÄܻᷢÉú½µ½â»òÊÇÎö³ö¡£


5¡¢Ï¸°ûÅàÑø»ùʹÓùý³ÌÖг£¼ûÎÊÌâ·ÖÎö


5.1¡¢Ï¸°ûÅàÑø»ùµÄ»º³åϵͳѡÔñ¼°pH±ä»¯ÎÊÌâ

ÓÉÓÚ´ó¶àÊýϸ°ûÊÊÒ˵ÄpHΪ7.0~7.4£¬Æ«Àë´Ë·¶Î§¿ÉÄܶÔϸ°ûÉú³¤²úÉúÓꦵÄÓ°Ïì¡£µ«¸÷ÖÖϸ°û¶ÔpHµÄÒªÇóÒ²²»ÍêÈ«Ïàͬ£¬Ô­´úÅàÑøµÄϸ°ûÒ»°ã¶ÔpH±ä¶¯ÄÍÊÜÁ¦²î£¬ÎÞÏÞϸ°ûϵÄÍÊÜÁ¦Ç¿¡£Òò´Ë£¬Ô­´úÅàÑøʱ£¬ÅàÑøÒºÖеĻº³åϵͳ¾ÍÏԵýÏΪÖØÒª¡£Ò»°ãµÄϸ°ûÅàÑø»ù²ÉÓõĶ¼ÊÇƽºâÑÎϵͳ£¬µ«²»Í¬µÄÅàÑø»ù»òÊÇͬһϵÁеÄÅàÑø»ùËùÓÃƽºâÑÎϵͳ²»Í¬£¬Èç199ϵÁС¢MEMϵÁоùÓÐHanks¡¯ÏµÍ³µÄÅàÑø»ù¼°Earle¡¯sϵͳµÄÅàÑø»ù¡£ÓÐЩÅàÑø»ù²»ÊÇÉÏÊö³£¹æµÄƽºâÑÎϵͳ£¬ÀýÈçRPMI1640ÅàÑø»ù¡¢F12ÅàÑø»ù¡£MEMµÍѪÇåÅàÑø»ùµÄƽºâÑÎϵͳҲ²»Êdz£¹æµÄƽºâÑÎϵͳ£¬¸ÃƽºâÑÎϵͳµÄ»º³åÄÜÁ¦Ç¿ÓÚ³£¹æƽºâÑÎϵͳµÄ»º³åÄÜÁ¦¡£

ϸ°ûÅàÑø¹ý³ÌÖÐpHֵϽµ²úÉúµÄÔ­ÒòÓкܶࡣÔÚϸ°ûÉú³¤·Ç³£¿ìʱ£¬pHֵͨ³£Ï½µµÃºÜ¿ì£¬´Ëʱ¿ÉÒÔͨ¹ý¼°Ê±´«´ú¡¢Ìá¸ß´«´ú±ÈÀý»ò½µµÍѪÇåÁ¿µÈ·½·¨½øÐнâ¾ö¡£´ËÍ⣬ÅàÑøÆ¿¸ÇÅ¡µÃ¹ý½ô¡¢NaHCO3»º³åϵͳ»º³åÄÜÁ¦²»¹»¡¢ÅàÑøÒºÖÐÑÎŨ¶È²»ÕýÈ·¡¢Ï¸¾ú¡¢½Íĸ»òÕæ¾úÎÛȾµÈÒ²Äܵ¼ÖÂpHֵͨ³£Ï½µµÃºÜ¿ì¡£Õâʱ£¬¿ÉÒÔͨ¹ýÒÔϼ¸ÖÖ·½·¨½â¾ö£º

1£©Ôö¼ÓÅàÑøÒºÖÐNaHCO3Ũ¶È»ò¼õÉÙÅàÑøÏäÄÚCO2Ũ¶È¡£NaHCO3º¬Á¿ÔÚ2.0 g/Lµ½3.7 g/LÖ®¼äʱ¶ÔÓ¦µÄCO2Ũ¶ÈΪ5~10%£»

2)¸ÄÓò»ÒÀÀµCO2ÅàÑøÒº£»

3)Êʵ±ËÉ¿ªÆ¿¸Ç¡£ÔÚÅàÑøÒºÖмÓHEPES»º³åÒº£¬Ê¹ÖÕŨ¶ÈΪ10~25 mM£»

4)ÔÚCO2ÅàÑø»·¾³ÖиÄÓûùÓÚEarle¡¯sÑÎÅäÖƵÄÅàÑøÒº£¬ÔÚ´óÆøÅàÑø»·¾³ÖÐÅàÑø¸ÄÓÃHanks¡¯ÑÎÅäÖƵÄÅàÑøÒº£»

5)Èç¹ûÊÇÎÛȾÔì³ÉµÄÔò¶ªÆúÅàÑøÎï»òÓÿ¹ÉúËسý¾ú¡£

5.2ϸ°ûÅàÑø»ù³£Óü¸ÖÖÖØÒªµÄÌí¼Ó³É·Ý¼°Ê¹Óùý³ÌÖÐӦעÒâµÄÎÊÌâ

·ÓºìÔÚϸ°ûÅàÑø»ùÖÐÓÃ×÷pHÖµµÄָʾ¼Á¡£Ò»°ãÇé¿öÏ£¬¿ÉÒÔͨ¹ý·ÓºìµÄָʾ×÷ÓÃÅжÏÅàÑø»ùµÄpHÖµ£¬µ«µÍѪÇå»òÊÇÎÞѪÇåϸ°ûÅàÑø»ùÖзӺìµÄº¬Á¿ÓëÆÕͨϸ°ûÅàÑø»ùÖеķӺ캬Á¿²»Í¬£¬²»ÄÜͨ¹ýÈâÑÛ¹Û²ì»òͨ¹ý¾­ÑéÀ´Åж¨pHÖµ£¬½¨ÒéʹÓÃpH¼Æ½øÐвⶨ¡£·Óºìͨ³£¶Ôº¬ÑªÇåµÄϸ°ûÅàÑø»ùÉú²úµÄÉúÎïÖÆÆ·ÖÊÁ¿²¢²»»á²úÉúÃ÷ÏÔÓ°Ï죬Ҳ¿Éͨ¹ý´¿»¯¼¼ÊõÈ¥³ý£¬µ«·ÓºìÔÚÎÞѪÇåϸ°ûÅàÑø»ùÖпÉÄÜ´øÀ´°ûÄÚÄÆ/¼Øʧºâ£¬Ó°Ïìϸ°ûÉú³¤¡£

̼ËáÇâÄÆÔÚϸ°ûÅàÑø»ùÖÐÖ÷ÒªÊÇ×÷Ϊ»º³åϵͳ£¬´ËÍ⻹¾ßÓе÷½ÚÉø͸ѹµÄ×÷Óá£Í¨³£²úƷʹÓÃ˵Ã÷ÖеÄ̼ËáÇâÄÆÍƼöÁ¿ÊÇÒ»¸ö±ê×¼¡¢°²È«Á¿£¬ÊÇÔÚ¿ÆѧµÄ»ù´¡Éϸù¾Ýʵ¼ù¾­ÑéËùµÃ¡£µ«ÊÇÓÉÓÚ²»Í¬µÄϸ°ûϵ£¨Ö꣩²»Í¬£¬Í¬Ò»Öêϸ°ûÊÊÓ¦»·¾³Ò²¿ÉÄܲ»Í¬£¨Ï¸°ûÄÍÊÜÐÔ²»Í¬µÈ£©£¬ÇÒ´æÔڵĵØÓòÐÔË®ÖʲîÒìµÈ£¬ÔÚʵ¼ÊÉú²ú¹ý³ÌÖÐÒ²¿ÉÉÔ×÷¸Ä¶¯£¬µ«Ê¹ÓÃÕßÐè×öÏàÓ¦µÄ¼ì²â£¨Àí»¯¼°Ï¸°ûÉú²úÊÔÑéµÈ£©¡£

HEPESÊÇÒ»ÖÖ·ÇÀë×Ó»º³åÒº£¬ÔÚpH 7.2¡«7.4·¶Î§ÄÚ¾ßÓнϺõĻº³åÄÜÁ¦£¬ÔÚ¸ßŨ¶Èʱ¶ÔһЩϸ°û¿ÉÄÜÓж¾¡£HEPES»º³åÒº¿ÉÓëµÍˮƽµÄ̼ËáÄÆ£¨0.34 g/L£©¹²Óã¬ÒÔµÖÏûÒò¶îÍâ¼ÓÈëHEPESÒýÆðµÄÉø͸ѹÔö¼Ó¡£Æ䰲ȫŨ¶È·¶Î§ÊÇ10¡«25 mmol/L¡£

±ûͪËáÄÆ¿ÉÒÔ×÷Ϊϸ°ûÅàÑøÖеÄÌæ´ú̼Դ£¬¾¡¹Üϸ°û¸üÇãÏòÓÚÒÔÆÏÌÑÌÇ×÷Ϊ̼Դ£¬µ«ÊÇÔÚûÓÐÆÏÌÑÌǵÄÌõ¼þÏ£¬Ï¸°ûÒ²¿ÉÒÔ´úл±ûͪËáÄÆ¡£

¹È°±õ£°·ÔÚÈÜÒºÖкܲ»Îȶ¨£¬4¡æÏ·ÅÖÃ1ÖÜ¿É·Ö½â50%£¬Ê¹ÓÃÖÐ-ºÃµ¥¶ÀÅäÖÆ£¬ÖÃ-20¡æ±ùÏäÖб£´æ£¬Ê¹ÓÃÇ°¼ÓÈëϸ°ûÅàÑøÒºÖС£